Подсчет численности микроорганизмов
Общую численность микроорганизмов определяли методом прямого счета с флуоресцентными красителями. Аликвоту образца концентрированного талого снега окрашивали красителем "LIVE/DEAD BacLight" (Invitrogen) согласно протоколу, указанному производителем.
После окрашивания 10 мкл суспензии наносили на предметное стекло, растирали стерильной микробиологической петлей на площади 1 см2, подсушивали и накрывали покровным стеклом. Далее под микроскопом Carl Zeiss Axioskop 2 Plyus (Carl Zeiss, Германия) с люминесцентной приставкой производили учет количества клеток в поле зрения. Для каждого образца делали три препарата, для каждого препарата просматривали 30 полей зрения.
Численность клеток микроорганизмов определяли по формуле:
N = [x*S1*(10 в степени k]]/(S2*V),
Где * - знак умножения, N - численность микроорганизмов (кл/мл), х - среднее число клеток в поле зрения, k - номер разведения (начиная с первого), S1 - площадь препарата на предметном стекле (мм), S2 - площадь поля зрения в микроскопе (мм), V - объем суспензии, наносимой на стекло.
Стандартную ошибку измерений рассчитывали по формуле (1) :
где St - стандартное отклонение, М - среднее значение показателя, Xi - среднее арифметическое показателя, N - количество измерений.
