Трансформация компетентных клеток E. coli (200 мкл)

200 мкл замороженной суспензии клеток E. coli dh5альфа размораживали во льду в течение 30 мин. Добавляли ДНК (5 мкл лигазной смеси). Инкубировали во льду 30 мин. Затем выдерживали клетки при 42*С в течение 40 с. и сразу охлаждали во льду в течение 15 мин. Добавляли подогретую (37*С) жидкую среду SOC до 0,5 мл и инкубировали при легком покачивании при 37*С 60 мин. На чашки Петри с агаризованной средой LB, содержащей соответствующий антибиотик, засевали по 100 мкл суспензии. Чашки Петри помещали в термостат на 37*С на ночь.

Ссылки: