Использование энергии гидролиза РРн для синтеза ATP
Установление роли мембранного потенциала в качестве общего интермедиата при синтезе АТР и РРн (неорганического пирофосфата) поднимало вопрос о возможности использования энергии гидролиза РРн для синтеза АТР в дрожжевых митохондриях. Такая возможность, как было показано, реализуется в хроматофорах Rh. rubrum [ Keister ea 1971 ] и в митохондриях печени [ Мансурова ea 1977 ]. Исследование включения Р32 митохондриями Е. magnusii и S. italicus в АТР в присутствии и отсутствии РРн показало ( табл. 10 ), что добавление в среду инкубации немеченого РРн (0,1 М) значительно стимулировало включение Р32-ортофосфата в АТР митохондриями Е. magnusii. Аналогичные результаты были получены и для митохондрий S. italicus. Это давало основание полагать, что митохондрии дрожжей способны использовать РРн для синтеза АТР. Кроме того, эти данные могли служить косвенным указанием на то, что усиление синтеза меченого АТР за счет немеченого пирофосфата не было связано с реакциями трансфосфорилирования, т. е. переносом активированного фосфатного остатка, а было обусловлено использованием энергии пирофосфата для синтеза АТР, Почти полное ингибирование синтеза АТР цианистым натрием и антимицином А в отсутствие РРн и слабое влияние на этот процесс ингибиторов переноса электронов в присутствии РРн исключало возможность того, что биосинтез АТР за счет РРн был опосредован работой дыхательной цепи, а блокирование реакции в значительной мере олигомицином и NaF предполагало участие неорганической пирофосфатазы и АТР-синтазы; Аналогичный подход был использован для выявления возможности использования энергии гидролиза АТР для синтеза РРн дрожжевыми митохондриями. Получены доказательства, что этот процесс также не был связан с переносом активного фосфорила и мог осуществляться в условиях блокирования дыхательной цепи.
Таким образом, дрожжевые митохондрии, как и митохондрии млекопитающих, были способны осуществлять альтернативный (по отношению к АТР) синтез РРн, зависимый от мембранного потенциала (окисление субстратов, гидролиз АТР) и использовать энергию фосфо- ангидридной связи РРн для синтеза АТР (или энергизации мембраны) (см. приведенную выше схему).
