Малатдегидрогеназа (МД) дрожжей
Дрожжи обладают тремя молекулярными формами малатдегидрогеназы (МД), одна из них содержится в митохондриях и две другие - в цитоплазме [ Duntze ea 1969 и др.]. Они отличаются структурно и генетически. Изозимы МД имеют близкие оптимумы рН, но различную кинетику в отношении Км для субстратов и Ki для ингибиторов [ Duntze ea 1969 ]. С ЦТК связан лишь малатдегидрогеназа (МД) митохондриальная . Из дрожжей S. cerevisiae, выращенных на ацетате, получены в очищенном до гомогенного состояния митохондриальная МД (мМД) и одна цитоплазматическая МД (цМД) [ Hagele ea 1978 ]. Оба изозима оказались димерами с Mr = 68 кДа для мМД и Mr = 75 кДа для цМД. Изозимы обнаруживали структурное сходство, но различались генетически. С помощью гельэлектрофореза в присутствии DDS-Na выявлены субъединицы изозимов с Mr = 35 кДа для мМД и с Mr = 39 кДа для цМД. Аминокислотный анализ показал довольно существенные различия у изозимов. Например, мМД содержит 45 остатков лизина и 18 остатков аргинина, а цМД - 30 и 24 соответственно. мМД имеет 1,7 свободных SH-групп на молекулу, а цМД - 8. Ни мМД, ни цМД не содержат триптофана. Подтверждено интересное наблюдение о том, что при росте дрожжей на глюкозе синтезируется лишь мМД [ Hagele ea 1978 ]. Подробное генетическое исследование митохондриальной МД у S. cerevisiae проведено в работе [ McAlister-Henn ea 1987 , Thompson ea 1988 ]. Определена нуклеотидная последовательность гена мМД , он содержит 1002 нуклеотида гена, кодирующего предшественник мМД из 334 аминокислотных остатков с Mr З6.6ОО Да Препоследовательность с N- конца, обеспечивающая импорт белка в митохондрии, составляет 17 остатков. Зрелая мМД имеет Mr = 33.500 Да и состоит из 317 аминокислот. мМД S. cerevisiae оказалась очень близкой по последовательности с мМД млекопитающих и с МД Е. coli, идентичными были 54% остатков с мМД млекопитающих (сердце свиньи) и 48% - с остатками МД Е. coli.
Малатдегидрогеназы (МД) млекопитающих
