MDR1(МЛУ1) Ген: индукция транскрипции, NFkB
Исследования свидетельствуют об участии NFkB в эпигенетической активации множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) . Фармакологические блокаторы активации NFkB - салицилаты , PDTC (пирролидиндитиокарбамат) , TPCK (тозил-L-фенилаланинхлорометилкетон) [ Kim H., 1995 , Kopp E., 1994 , Ziegler-Heitbrock H.W., 1993 ] - предотвращают индукцию гена MDR1 цитозаром , доксорубицином и ТФА в лейкозных клетках ( рис. 2 ). Эти данные согласуются с результатами опытов по блокированию PDTC активации NFkB и гена MDR1 при воздействии кадмия на почечный эпителий [ Thevenod F., 2000 ].
Экспрессия экзогенного NFkB (р50/р65) активирует промотор гена MDR1 в лейкозных клетках. Выяснение роли NFkB в регуляции столь важного фенотипа, как Pgp -onoсредованная МЛУ, расширяет значение NFkB в качестве одного из общих апоптозлимитирующих механизмов [ Huang T.T., 2000 , Wu M.X., 1998 ].
Вместе с тем, механизм участия NFkB в активации гена MDR1 может быть сложным. Необходимо выяснить возможность прямого взаимодействия NFkB с промотором MDR1. Области, задаваемые консенсусной нуклеотидной последовательностью 5'- GGGRNNYYCC -3' (где R - любое пуриновое основание, a Y - любое пиримидиновое основание), с которой способен связываться димер р50/р65 [ Grilli M., 1993 ], не обнаружены в участке -1202/+118 промотора MDR1; при этом промотор- репортерная конструкция, несущая этот район, активируется NFkB (р50/р65). Возможно, NFkB активирует ген MDR1 не прямо, а через индукцию гена (или генов), продукт которого необходим для активации MDR1. Если это так, то активацию гена MDR1 можно представить как регуляторный каскад, когда непосредственному взаимодействию транскрипционного фактора (факторов) с промотором MDR1 предшествует индукция самого этого фактора (например, через посредство NFkB) ( рис. 2 ). Кроме того, дополнительные NFKB-зависимые события могут быть необходимы для индукции транскрипции и/или посттранскрипционной регуляции. Примером может служить взаимодействие NFkB и Sp1 в связи с трансактивационной функцией Sp1 [ Ueda A., 1994 ].
Рассмотрение роли NFkB в индукции множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) затрагивает вопрос о взаимодействии цитоплазматических (сигнальная трансдукция) и ядерных (транскрипционные факторы, хроматин) механизмов. Поскольку киназные каскады участвуют в активации МЛУ, важно выяснить, как активация протеинкиназ связана с инициацией транскрипции. Предварительные данные о функциональной значимости таких взаимодействий получены при активации MDR1 ретиноевой кислотой в клетках нейробластомы [ Thayer S.P. 1999 ]. Ретиноевая кислота вызывает диссоциацию изоформ Sp3 от ДНК промотора MDR1 in vitro. Инкубация ядерных экстрактов клеток, обработанных ретиноевой кислотой, с ингибитором фосфатаз восстанавливает связывание [ Thayer S.P. 1999 ]. Индуцируемое ретиноевой кислотой фосфорилирование приводит, видимо, к конформационным изменениям изоформ Sp3 и разобщению взаимодействия этих белков с промотором.
Данные об участии протеинкиназ в модификациях хроматина позволяют получить более полное представление о связи транскрипции генов с механизмами передачи сигналов [ Cheung P., 2000 ].
