p53-Белок и старение клетки
Предполагалось, что р53 является геном, связанным со старением [ Shay, ea 1993 ]. Однако эти заключения были основаны на экспериментах, в которых клетки, подвергнутые трансфекции антигеном LT или Е6/Е7 , избегали старения и имели увеличенную продолжительность жизни. Кроме того, отмечено увеличение продолжительности жизни HDF , изолированных от больных с синдромом Ли-Фромени с мутацией p53 [ Bischoff, ea 1990 ]. Такое увеличение продолжительности жизни связано с потерей р53 [ Rogan, ea 1995 ]. В свете данных о роли р53 в регуляции контрольного пункта G1 [ Kastan, ea 1991 ] и данных о том, что во всех описанных выше экспериментах р53 не был активен даже в молодых пассируемых клетках, уход от старения мог быть обусловлен нестабильностью генома и вторичными мутациями, связанными с потерей исходной функции р53. Суперэкспрессия мутантного гена р53 в нормальных клетках также может увеличивать продолжительности жизни клеток [ Bond, ea 1994 , Gollahon, ea 1996 ]. Это указывает на более прямую роль р53 в старении клеток. Более ранние исследования свидетельствовали, что уровень мРНК гена р53 при старении не повышается [ Irving, ea 1992 ]. По другим данным в стареющих клетках уровень белка р53 либо не меняется [ Atadja, ea 1995 ], либо повышается [ Kulju, ea 1995 ]. Согласно нашим собственным данным эти противоречия вызваны методами обнаружения белка р53. Мы показали, что стабильный уровень белка р53, измеренный прямым вестерн-блоттингом, не изменяется [ Vaziri, ea 1997 ].
Однако если белок определяется с помощью вторичного антитела после иммунопреципитации, то выявляются и различные изоформы p53 [ Vaziri, ea 1997 ], что выглядит как суперэкспрессия. Различные изоформы р53, вероятно, накапливаются в стареющих клетках, несмотря на отсутствие повышения суммарного уровня этого белка. Эти альтернативные формы белка р53 могут активировать неидентичные последующие пути подавления пролиферации, в том числе р21 и IGF-BP3 , которые в свою очередь способствуют запуску клеточного старения.
