Искусственное осеменение сук: общие сведения
Искусственное осеменение (ИО) собак может быть показано при аномальной анатомии вульвы или влагалища (влагалищные стриктуры или гиперплазия ), узкой вульве или влагалища у невязанных сук или при доминирующем или агрессивном темпераменте суки, которые препятствуют появлению нормального рецептивного поведения. Показаниями для кобелей являются слабое либидо, слабость и боли во время вязки или эякуляции из-за заболеваний позвоночника, тазовых конечностей или предстательной железы, а также агрессивный темперамент. ИО также показано при необходимости получения потомства от суки и кобеля, живущих в разных географических областях, тогда используют замороженную сперму.
У кобелей сперму обычно собирают путем мануальных манипуляций, используя резиновый сборный конус, присоединенный к пластиковой трубке от центрифуги. Присутствие течной суки в эструсе или обработанной местными феромоновыми препаратами (EAUd'Estrus, Synbiotics, Malvern, РA) улучшает качество взятия образцов. Процедуру следует проводить на полу с нескользкой поверхности, а суку должен контролировать опытный специалист, чтобы она не смогла нанести вреда кобелю.
Кобелю позволяют обнюхать заднюю часть суки и даже залезть на нее, если он хочет. Пенис быстро и энергично массируют через препуций поверх луковичных желез. После эрекции пениса препуций оттягивают каудально к увеличенным луковичным железам, а поверх пениса надевают резиновый конус. Резиновый конус укрепляют проксимально к луковичным железам и плотно зажимают его пальцами вокруг пениса, чтобы создать ощущение бульварных губ суки во время замка при естественной вязке.
Семенная жидкость собак эякулируется в три этапа. Первая фракция представляет собой малое количество прозрачной жидкости, это так называемая предсперма. Вторая фракция, богатая спермой, мутная, ее объем колеблется от 0,5 до 3,0 мл. При эякуляции этой фракции кобель обычно совершает самые сильные толчки. Затем наступает пауза, и кобель может попытаться оседлать руки оператора во время эякуляции последней фракции, которая состоит из прозрачной жидкости предстательной железы. Пульсирование уретры и частота сокращений анального отверстия соответствуют толчкам эякуляции простатической жидкости.
Количество простатической жидкости варьирует в зависимости от предназначения семенной жидкости. Поскольку инкубация сперматозоидов с аутологической простатической жидкостью снижает прогрессирующую подвижность этих сперматозоидов, рекомендуется хранить сперму с минимальным количеством простатической жидкости. В образцах, которыми будут осеменять сук сразу после взятия семенной жидкости, допускается присутствие простатической жидкости, которая создает нужный объем эякулята. В зависимости от веса сук объемы семенной жидкости будут следующими: 1,5-3,0 мл для сук весом 4,5 кг и меньше, 3,0-5,0 мл - для сук весом 4,5-22,7 кг и 5,0-8,0 мл для сук весом больше 22,7 кг.
После окончания взятия семенной жидкости резиновый конус осторожно снимают с пениса кобеля. Перед возвращением кобеля в питомник необходимо дождаться полной детумесценции его пениса.
Затем оценивают качество семенной жидкости. Следует выполнить оценку прогрессивной подвижности сперматозоидов (в нормальном состоянии более 70%), а также их точное количество или отношение количества подвижных сперматозоидов к их общему числу (в нормальном состоянии - 300 миллионов на 2 миллиарда). Не следует осеменять сук плохими по качеству образцами. Полная оценка семенной жидкости описана в различных источниках ( Root and Johnston, 1994 ). Рекомендуется использовать семенную жидкость, в которой как минимум 150-200 миллионов подвижных сперматозоидов.
Семенную жидкость можно использовать сразу (ИО свежей семенной жидкостью), можно разводить ее наполнителем, который питает и защищает сперматозоиды, и охлаждать перед осеменением, которое проводят через 24 часа после взятия (ИО охлажденной семенной жидкостью с наполнителем), либо вводить наполнитель с криопротектором, замораживать и хранить в жидком азоте (ИО замороженной семенной жидкостью). Для охлажденной семенной жидкости выпускают различные наполнители (Fresh Express, Synbiotics, Malvern, PA; International Canine Semen Bank, North Ridgeville, OH; Fresh Kooled Canine Semen, Camelot Farms, Coledge Station, TX).
Очень важно правильно выбрать момент овуляции и осеменения (см. " И. прогестерона сыворотки крови для регуляции времени овуляции у сук "). При осеменении свежей или охлажденной семенной жидкостью с наполнителем рекомендуют хотя бы одно оплодотворение через 2 дня после овуляции. При осеменении замороженной семенной жидкости нужно хотя бы одно осеменение через 3 дня после овуляции. Последняя рекомендация связана с тем, что замороженные сперматозоиды живут в половых путях суки только один час (по сравнению с охлажденными - 5 дней и свежими - 6 дней). Для оплодотворения замороженной спермой уже должны быть зрелые яйцеклетки. Поскольку сперматозоиды в свежей и охлажденной семенной жидкости очень жизнеспособны, это создает большой отрезок времени для оплодотворения.
Осеменение проводят в краниальную часть влагалища или в матку. Для внутривлагалищного осеменения сук выпускают специальные пипетки (Synbiotics, Malvern, РА), но они слишком короткие для сук крупных пород. Можно приспособить длинные пипетки для маточных инфузий, применяемые у крупного рогатого скота (Nasco, Fort Atkinson, ИТ), которые отрезают по размеру конкретной собаки; длина от вульварных губ до краниальной части влагалища равна половине расстояния от вульварных губ до реберной дуги. Баллонный катетер помогает стимулировать мышечные сокращения влагалища и предотвращает рефлюкс спермы (Osiris probe, l.M.V.Ltd., I'Aigle, France).
Суку ставят на стол или на пол, сдерживая так, чтобы не прикладывать давления на каудальную часть брюшной полости. Стерильный шприц заполняют семенной жидкостью, а затем надевают на него пипетку. Во влагалище вводят палец в перчатке, смоченный водой или смазкой. В дорсальную спайку влагалища в краниальном направлении как можно дальше вводят пипетку, направляя ее дорсокраниально поверх пальца. Образец семенной жидкости вводят через пипетку, а затем вводят пузырек воздуха, чтобы очистить шприц от семенной жидкости. Вынимают пипетку. Пальцем в перчатке осторожно стимулируют влагалище несколько минут, чтобы идуцировать сокращение влагалищных мышц. Вынимают палец в перчатке, а заднюю часть тела суки поднимают на 5-10 минут. Суку забирает владелец или ее отправляют в питомник, поместив в контейнер-перевозку. В течение последующих 30-60 минут ей не позволяют мочиться или испражняться, а также прыгать.
Внутривлагалищное осеменение проводят свежей или охлажденной семенной жидкостью с наполнителем. Замороженную семенную жидкость нужно вводить прямо в матку, потому что замороженные сперматозоиды не могут преодолеть шейку матки. Если использовать большой объем замороженной семенной жидкости, то можно добиться успеха и при внутривлагалищном осеменении.
Внутриматочное осеменение можно выполнять хирургическим путем, вводя семенную жидкость иглой малого размера путем лапаратомии, лапароскопии или через трансцервикальный катетер. Описаны два способа трансцервикальной катетеризации. В одном используется жесткий катетер, который вслепую вводят через влагалище и шейку матки после пальцевой фиксации шейки через брюшную стенку ( Linde-Forsberg and Forsberg, 1989 , Linde-Forsberg and Forsberg, 1993 ). В другом вводят полипропиленовый катетер 8F через шейку матки после эндоскопической визуализации цервикальной кости ( Wilson, 1993 ).
По сравнению с осеменением замороженной семенной жидкостью при использовании свежей семенной жидкости величина помета увеличивается на 23,3-30,5%.
