Инфекции, вызванные Bartonella vinsonii у собак: диагностика
У собак с эндокардитом , вызванным Вartonella vinsonii , заболевание протекает долго. Постепенно возникают сердечные шумы и начинается потеря веса . Некоторые собаки хромают то на одну, то на другую конечность, что может быть вызвано полиартритом или нечетко локализованной болью в костях . Подобные болезненные симптомы встречаются и у людей, инфицированных бактериями вида Bartonella .
Результаты гематологического и биохимического исследований не являются специфическими, поэтому показатели зачастую находятся в пределах нормы. Таким образом, для постановки надежного диагноза необходима информация об образе жизни собаки, подозреваемой в наличии Bartonella-инфекции, дополненная серологическим тестированием. Собаки с В.vinsonii-эндокардитом могут проявлять клинические, гематологические и биохимические отклонения, сопровождающиеся грамотрицательным сепсисом . При первом обследовании можно обнаружить слабую анемию , тромбоцитопению , нейтрофилию со слабым сдвигом влево, слабую нейтрофильную токсичность и гипогликемию . Вегетативные поражения наиболее часто затрагивают аортальный клапан, а также вызывают аритмию или отклонения при индуцировании возбуждения.
Серологическое тестирование. Обнаружение антител на бактерии вида Bartonella - это самый приемлемый метод диагностики. Если при иммунофлюоресцентном анализе ( ИФА ) титр антител IgG превышает 64, это указывает на заражение данным микроорганизмом в прошлом или настоящем. При серологическом тестировании 1920 зараженных клещами собак Северной Каролины и Вирджинии на антигены В. vinsonii положительные результаты составили всего 3,6%, что указывает на довольно низкую степень заражения данным микроорганизмом и определенную специфичность анализа. Степень распространения заражения Вartonella henselae или Вartonella clarridgiae (это происходит при укусах кошек блохами ), при которой может возникать кросс-реактивный ответ на антитела, не установлена. Титры антител, полученные у собак с клиническими отклонениями, могут частично совпадать с теми, которые были получены от здоровых собак. Проведенные исследования позволяют сделать предположение о том, что собаки могут длительно быть носителями бессимптомной инфекции или что среди различных цепочек Вartonella vinsonii подвида berkhoffii может существовать значительная патогенетическая изменчивость. Титры, полученные у клинически больных собак для проведения ИФА , варьируют от 128 до 8192. Один из недостатков серологического тестирования связан с его неспособностью определить, о чем именно свидетельствует реакция на антитела - о прошлом заболевании, о его ранней или активной стадии. Кроме того, не установлена и степень кросс-реактивности у собак на различные виды бартонелл или на другие бактерии, например, Chlamydia psittaci , которые вступают в перекрестную реакцию с антигенами бартонеллы в образцах человеческой сыворотки. Так после экспериментального введения собакам единичной внутривенной инъекции В. vinsonii подвида berkhoffii IgG титров антител быстро повысился в течение 3-11 дней и оставался на этом уровне в течение 8 месяцев.
Культивироввние крови. Из образцов крови собаки или человека трудно выделить культуру Bartonella spp. Лизис-центрифугирование для получения культуры крови подтвердила свою чувствительность и увеличила возможность выделения данного микроорганизма. Положительные культуры были получены у людей путем прямого гальванического осаждения крови, обработанной этилендиаминтетрауксусной кислотой, тканей лимфатических узлов или жидкости, откаченной из пораженных органов. Оптимальные условия in vitro для роста В. vinsonii требуют инкубации в атмосфере, обогащенной двуокисью углерода, температуры от 35 до 37*С и среды, подпитываемой кровью. Если эти бактерии выращиваются в твердой среде, то цвет их колонии обычно варьирует от чисто-белого до беловато-сероватого или беловато-желтоватого. После выращивания их часто помещают в агар. В большинстве микробиологических лабораторий кровяные культуры выращивают в мясном бульоне, а начинают использовать через неделю. Некоторые виды бартонеллы могут потребовать более длительной инкубации на первичных гальваноклише культуры, причем лишь через 2 месяца можно будет зримо оценить их рост. Таким образом, культуро-отрицательные результаты, полученные в результате соответствующей обработки образцов крови, не обязательно свидетельствуют об отсутствии активной инфекции. Предварительное замораживание стерильных образцов крови, обработанных этилендиаминтетрауксусной кислотой, повышает вероятность выделения В. henselae из крови кошек и может облегчать выделение В. vinsonii у собак.
Специвльные крвсители. Бартонелл можно увидеть под световым микроскопом благодаря использованию специальной краски. Краситель Грама для микроорганизмов позволяет обнаруживать грамотрицательные, слегка изогнутые, плеоморфные палочки. Серебряный краситель Вартарина-Старри облегчает обнаружение бартонелл в образцах тканей. Благодаря этим красителям палочкообразные микроорганизмы становятся черными на оранжевом фоне. Акридиново-оранжевый краситель и краситель Гименеза помогают выявить данный микроорганизм в образцах, взятых из стерильных емкостей для крови или с помощью методов получения тканевых культур.
