YIp Вектор

Интегративные векторы YIp встраиваются в хромосому по гомологии с проклонированным в них дрожжевым фрагментом. Эффективность трансформации низкая, но ее можно повысить в 1000 раз, линеаризовав плазмиду ( Hicks et al., 1979a ). YIp высоко стабильны, содержатся в основном в виде одной копии, хотя в некоторых трансформантах может оказаться до 5 копий на геном ( Orr-Weaver, Szostak, 1983 ). Сконструирована интегративная плазмида pMIRY2 с фрагментом рДНК, по которому возможна интеграция в кластер рибосомальных генов , и дефектный ген LEU2d. Компенсация ауксотрофности по лейцину наступает только, если этот ген содержится в большом количестве копий. На среде без лейцина можно отобрать множественные интегранты (200 копий pMIRY2 на клетку). Предполагается ее использование для создания промышленных штаммов с высоким уровнем экспрессии проклонированных в pMIRY2 генов ( Masters et al., 1989 ).

Ссылки: