Нуллиморфы

Один из способов получения нуллиморфов - трансформация интегративной плазмидой с YIp внутренним фрагментом гена. В результате интеграции плазмиды в хромосоме оказываются два неактивные копии гена ( Shortle et al., 1982 ). По другой методике ген на плазмиде инактивируют, встраивая в него селективный для трансформации маркер. Трансформация фрагментом плазмиды с дизруптированным геном возможна только при замещении генной копии ( Rothstein, 1983 ). Использование в качестве дизруптирующей последовательности гена URA3 , обрамленного прямыми повторами, позволяет селектировать Ura-, у которых функция гена по-прежнему нарушена, т.к. в нем остается повтор. У такого штамма можно производить дизрупцию других генов тем же способом ( Alani et al., 1987 ).

Ссылки: