Белки, активируемые цАМФ
При накоплении цАМФ в клетке активируется цАМФ-зависимая протеинкиназа ( A-киназа ). Маркированы и клонированы гены, кодирующие регуляторную ( BCY1 ) ( Cannon, Tatchell, 1987 ; Matsumoto et al., 1982 ) и каталитическую ( ТРК1 , ТРК2 , ТРК3 ) ( Toda et al., 1987 ; Cannon et al., 1986 ) субъединицы A-киназы. Мутанты в этих генах можно отобрать , как супрессоры мутаций ras2.
Фенотип мутантов bcy1 и tpk свидетельствует о том, что каталитическая субъединица активируется при отсоединении регуляторной. Фенотип bcy1 сходен с фенотипом RAS2val19. У мутантов нарушены реакция споруляции , реакция на стресс , что характерно для постоянно активированной A-киназы. Мутации в генах ТРК , супрессирующие мутации ras2 , приводят к тому, что каталитическая субъединица перестает регулироваться продуктом гена BCY1. Дизрупция ТРК1, ТРК2 и ТРК3 супрессирует мутации в гене BCY1: восстанавливается способность к споруляции и развитию стрессовой реакции. Гены ТРК1, TPK2 и TPK3 взаимозависимы, поэтому супрессия мутаций bcy1 происходит при нарушении функции всех трех генов одновременно ( Cameron et al., 1988 ).
Возможно, кроме цАМФ-зависимой протеинкиназы в клетке есть и другие белки, активируемые аденилатциклазой . Маркировали и клонировали ген CCS1 , мутация в котором по фенотипу напоминает мутацию RAS2val19 и супрессирует мутацию cdc35 . Следовательно, ген ССS1 действует позже гена cdc35 ( Bussereau et al., 1990 ).
A-киназа и другие киназы, активируемые цАМФ, очевидно, фосфорилируют большое количество белков, запуская регуляторные каскады. К числу этих белков относится основной регулятор митотического цикла - протеинкиназа CDC28p . Еще один белок, активность которого подавляется в результате фосфорилирования A-киназой - протеинкиназа YAK1p . Мутации yak1 являются супрессорами мутаций ras2 и tpk ( Garrett, Broach, 1989 ).
