Случайная выборка аскоспор

Анализ гаплоидных клонов, выросших из случайной выборки аскоспор, позволяет решить те же задачи, что и тетрадный анализ, за исключением картирования центромеров. В случаях, когда не требуется рассматривать индивидуальные мейозы, и нет оснований предполагать аномалии сегрегации хромосом, лучше пользоваться этим методом. Случайная выборка менее трудоемка, позволяет проанализировать большие количества спор и дает больше информации, чем тетрадный анализ при одном и том же числе аскоспор (сравним, например, 32 аскоспоры или 8 тетрад). При плохой споруляции или фертильности случайная выборка - единственный метод анализа расщепления.

Ожидаемое расщепление по каждому маркеру в случайной выборке - 1:1.

При отсутствии сцепления между генами A и В ожидается соотношение

1AВ:1ав:1аВ:1AВ

При сцеплении расстояние между генами A и В

Dав = 100 f(рек)/f(рек) + f(род) (сМ)

где f(рек) - частота аскоспор с рекомбинантными сочетаниями аллелей, f(род) - с родительскими.

Поскольку при постановке случайной выборки не удается полностью избавиться от диплоидных клеток, используют маркеры- селекторы, которые позволяют с уверенностью отобрать клоны - мейотические потомки исследуемого гибрида. У клонов, полученных таким образом, расщепление 1:1 будет наблюдаться только по маркерам, несцепленным с селектором.

Ссылки: