Ген АФП: регуляторный район: репрессорные элементы
У всех исследованных видов были идентифицированы репрессорные последовательности, расположенные между промотором и энхансерами гена АФП . Вероятно, они играют основную роль в подавлении транскрипции гена АФП после рождения [ Wen P. et al, 1991 , Camper S.A. and Tilghman S.M., 1989 , Vacher J. and Tilghman S.M., 1990 , Nakabayashi H. et al, 1991 ]. У трансгенных мышей удаление репрессорной последовательности - 800/-250 п.н. приводит к сохранению экспрессии контролируемого энхансерами и промотором АФП трансгена в печени и кишечнике взрослых мышей [ Vacher J. and Tilghman S.M., 1990 ].
Экспрессия трансгена в такой системе носит зональный характер: она наблюдается только в гепатоцитах , окружающих центральную вену [ Emerson J.A. et al, 1992 ] и определяется, вероятно, активностью энхансера EIII .
В регуляторном районе крыс репрессор также примыкает к промоторному району [ Wen P. et al, 1991 , Mathew J.K. et al, 1994 ]. Деления репрессора приводит к восстановлению экспрессии репортерного гена, контролируемого промотором АФП в клетках человеческой гепатомы Н4СЗ , не экспрессирующей АФП [ Wen P. et al, 1991 ]. Этот репрессор способен также подавлять активацию промотора АФП гетерологичным энхансером SV40 .
В регуляторном районе гена АФП человека выявлено по меньшей мере два репрессора : -1822/-951 и -402/-169 п.н. Более сильный, дистальный, репрессор блокирует активность гомологичных и гетерологичных энхансеров в зависимости от положения и независимо от ориентации, но практически не влияет на работу промотора АФП [ Nakabayashi H. et al, 1991 ].
В промоторе гена АФП мыши идентифицирована последовательность -57/-43 п.н., которая необходима для подавления экспрессии гена АФП в клетках негепатоцитарного происхождения. При взаимодействии с ядерными экстратами, полученными из культуры эмбриональных крысиных фибробластов , эта последовательность образует три комплекса, специфичных для клеток этого типа, причем один из этих комплексов выявляется в экстрактах из АФП-непродуцирующих клеточных линий как негепатоцитарного, так и гепатоцитарного происхождения [ Henriette M.F. et al, 1997 ].
Еще одна, предположительно репрессорная последовательность расположена в районе -608/-371 п.н. [ Henriette M.F. et al, 1997 ]. Негативные факторы, связывающиеся с этими последовательностями, пока не идентифицированы.
