Кальций: высвобождение GTP (ГТФ) стимулируемое из Ин1,4,5-Ф3 не чувств. депо
При поиске факторов, повышающих Ин-1,4,5-Ф3-зависимый выход кальция , на микросомах печени крысы [ Dawson,1985 ; Dawson ea,1986 ], на пермеабилизованных дигитонином гепатоцитах [ Thomas,1988 ] была обнаружена сильная стимуляция выхода кальция под действием ГТФ. ГТФ может вызывать высвобождение кальция даже без действия Ин-1,4,5-Ф3 на пермеабилизованных клетках нейробластомы N1Е-115 и гладкомышечных клетках линии DDNVF-2 [ Gill ea,1986 ; Ueda ea,1986 ] на тяжелой фракции микросом из клеток околоушной железы [ Henne,Soling,1986 ]. Как для усиления выхода кальция под действием Ин-1,4,5-Ф3, так и для собственной стимуляции ГТФ характерно следующее: 1. Абсолютная специфичность ГТФ. 2. Необходимость гидролиза терминального фосфата ГТФ. Негидролизуемые аналоги, а также ГДФ блокируют действие ГТФ. 3. Действие ГТФ проявляются при концентрации 1-50 мкМ 4. Полиэтиленгликоль способствует высвобождению кальция под действием ГТФ.
Предполагалось [ Brown,Birnbaumer,1988 ], что процесс опосредован G-белками . Но все системы, находящиеся под контролем G-белков, активируются ГТФ и еще более эффективно его негидролизуемыми аналогами GTPgammaS и Gpp(NH)P , тогда как выход кальция не стимулируется его негидролизуемыми аналогами. На основании работ [ Chueh ea,1987 ; Gill,Chueh,1985 ; Mullaney ea,1987 ] была сформулирована гипотеза, что существует два типа внутриклеточных кальциевых депо : чувствительные к Ин-1,4,5-Ф3 и нечувствительные, причем первые проницаемы для оксалата , вторые нет ( рис.50 ГТФ-зависимое взаимодействие внутриклеточных везикул ). Между ними образуется ГТФ-зависимые контакты, обеспечивающие поступление кальция из нечувствительных в чувствительные к Ин-1,4,5-Ф3 емкости. Везикулы, содержащие эти хранилища удалось разделить. В тяжелых фракциях было высокое содержание рецепторов Ин-1,4,5-Ф3, в легких их почти не было.
В легких фракциях иммуноблотингом был выявлен кальциевый насос Са- АТФаза характерная для сердца и белок, реагирующий с антителами на калсеквестрин .
