GRU комплексная гена PEPCK крысы
В хорошо изученных регуляторных районах генов, контролируемых глюкокортикоидами, GRE часто собраны в кластеры, либо расположены по соседству с какими-либо регуляторными элементами. Во многих случаях показано, что эти дополнительные элементы необходимы для глюкокортикоидной регуляции.
Одним из ярких примеров этого является комплексная GRU [ Imai E. et al., 1990 ] промоторной области гена PEPCK крысы ( G000782 ). Схема строения этой функциональной единицы представлена на рис. 3 . Изображенный участок промотора содержит несколько регуляторных элементов, четыре из которых составляют GRU (два GRE и два вспомогательных элемента - AF1 и AF2 ). В присутствии всех четырех элементов наблюдается 11-ти кратная индукция репортерного гена глюкокортикоидами . Одновременная делеция вспомогательных элементов AF1 и AF2 в пять раз уменьшает степень индукции. Делеция только AF1 или AF2 приводит к двукратному снижению уровня индукции. К такому же результату приводит и делеция любого из сайтов связывания ГР .
C AF1-элементом связываются транскрипционные факторы HNF- 4 и COUP-TF , которые, как полагают, участвуют в глюкокортикоидной индукции [ Hall R.K. et al., 1995 ].
Необходимыми для гормональной индукции факторами, взаимодействующими с AF2, являются, встречающиеся преимущественно в печени , члены семейства факторов транскрипции HNF-3 [ Wang J.C. et al., 1996 ]. Важно отметить, что элемент AF2 перекрывается с элементом IRS , ответственным за подавление инсулином индукции PEPCK глюкокортикоидами [ O'Brien R.M. et al., 1990 ]. Перекрывание сайтов связывания HNF-3 и элементов IRS наблюдается также и в регуляторных районах гена TAT и гена белка 1 , связывающего инсулиноподобный фактор роста . Индукция этих генов глюкокортикоидами в печени также блокируется инсулином [ O'Brien R.M. et al., 1995 , Ganss R. et al., 1994 ].
В свою очередь, AF1-элемент перекрывается с RARE ( рис. 3 ). При этом показано, что связывающийся с ним комплекс RARальфа/RXRальфа не участвует в глюкокортикоидной регуляции и обеспечивает индукцию гена PEPCK ретиноевой кислотой [ Hall R.K. et al., 1995 ]. Для полной активации транскрипции гена PEPCK глюкокортикоидами помимо GRU необходим сAMP-регулируемый элемент ( CRE ), который расположен ближе к старту транскрипции ( рис. 3 ).
