Leu5/Rfp2-Ген

При В-клеточном хроническом лимфолейкозе (В-ХЛЛ) наиболее частым кариотипическим изменением, обнаруживаемым с помощью стандартных цитогенетичксих методов, являются делеции хромосомы 13 в районе 13q14.3. Следующими по частоте являются структурные изменения в длинных плечах хромосомы 11, 6 и 14, а также трисомия 12. Работы по поиску гена- супрессора, утрачиваемого или повреждаемого при В-ХЛЛ начались в 1994 г. В 1997 г. были выделены два перекрывающихся клона кДНК (CLL2 и CLL5), представляющих собой кодирующую область нового гена человека, получившего название Leu5. С помощью гибридизации по Саузерну было обнаружено, что кодирующаяя область этого гена расположена на расстоянии около 60 т.п.н. от границы минимального участка утрачиваемого у больных с В-ХЛЛ. Ген Leu5 кодирует белок в высокой степени гомологичный известным белкам человека, вовлеченным в процессы канцерогенеза, эмбриогенеза и регуляцию иммунного ответа.

При общей длине гена 407 аминокислот в его составе можно выделить три консервативных домена:

- Цинк-связывающий домен RING-типа , встречающийся в таких генах- супрессорах, как BRCA1 и BRCA2 , и способный связывать ДНК, а также обеспечивать взаимодействие с ней белковых комплексов.

- Другой цинк-связывающий домен, называющийся В-бокс , тоже взаимодействующий с ДНК.

- Так называемый спирально скрученный домен.

Такое сочетание доменов позволяет отнести ген Leu5 к семейству Rfp (Ret finger protein) . Это белковое семейство эволюционно- консервативно, что свидетельствует о его значимости для жизни клетки. Так, близкие гомологи белка Leu5 обнаружены у гребенчатого тритона , шпорцевой лягушки и даже червя Cаenorhabditis elegans . Кроме того, белок Leu5 содержит целый ряд участков подвергающихся посттрансляционным изменениям, к примеру, фосфорилированию протеинкиназой С и другими протеинкиназами, принимающими участие в запуске опухолевого процесса.

Удалось клонировать два 5'-концевых нетранслируемых экзона длиной 101 и 65 нуклеотидных пар, отстоящих на значительное расстояние от кодирующей области гена Leu5 - это расстояние составляет не менее 20 т.п.н. Удалось определить хромосомную ориентацию гена - его транскрипция происходит в направлении от центромеры к теломере. Также обнаружено, что между первым и вторым нетранслируемыми экзонами Leu5 расположен выраженный CpG-островок, поэтому возможна регуляция экспрессии этого гена посредством метилирования.

Из всех генов до настоящего времени обнаруженного в исследуемом районе, только клонированный ген Leu5 имеет длинную открытую рамку считывания и значимые гомологии к известным регуляторным белкам человека, позволяющие высказать предположения о его функции. Поэтому ген Leu5 является первостепенным кандидатом на роль супрессора опухолевого роста, вовлеченного в развитие В-ХЛЛ.

Ссылки: