GSPT: идентификация как eRF3
В процессе белкового синтеза у эукариот все три типа стоп-кодонов непосредственно узнаются фактором терминации eRF1 , после чего синтезированная полипептидная цепь покидает рибосому [ Frolova, ea 1994 ]. По аналогии с системой терминации трансляции прокариот следовало предположить участие еще одного, GTP-связывающего фактора ( eRF3 ), в связывании eRF1 с рибосомой . Функционирование GSPT как eRF3 показано в исследованиях на дрожжах S. cerevisiae [ Stansfield, ea 1995 ] и лягушке Xenopus laevis [ Zhouravleva, ea 1995 ]. Продукт гена GSPTl/Sup35 образует комплекс с Sup45p , представителем омнипотентных супрессоров , функционирующим как eRF1. Эти результаты позволили предположить, что GSPT млекопитающих также выполняет функции eRF3. В наших предыдущих работах [ Hoshino, ea 1988 , Hoshino, ea 1999 ] показано, что белки GSPT млекопитающих способны связываться с eRF1 как в дрожжевой двугибридной системе, так и в биохимических опытах по связыванию in vitro. Для этого взаимодействия необходим С-концевой фрагмент GSPT/eRF3; GSPT2, лишенный С-концевых доменов 2 и 3, теряет способность связываться с eRF1. Более того, GSPT/eRF3 без N-концев ого участка сохранял способность связываться с eRF1. Таким образом, С- концевой фрагмент eEFla-подобного участка (предположительно домены 2 и 3) содержит участок связывания с eRFl. Это предположение подтверждается данными об отсутствии существенных различий связывания с eRFl для двух подтипов белков GSPT [ Hoshino, ea 1988 ]. Аналогичные результаты получены другими группами исследователей [ Merkulova, ea 1999 , Ebihara, ea 1999 ], а функциональное взаимодействие факторов подтверждено экспериментально Фроловой с соавт. [ Frolova, ea 1998 ].
