Гепатит C: этиология (вирус гепатита C)
Содержание вируса гепатита C в крови низкое, поэтому его очень трудно обнаружить с помощью микроскопии. Культивирование вируса in vitro разработано плохо, поэтому его изучают в экспериментах на шимпанзе.
При исследовании вирусной РНК было выделено по меньшей мере 6 генотипов вируса, внутри которых существуют подтипы. Среди вирусов, принадлежащих к одному подтипу, в том числе выделенных у одного больного, тоже наблюдается изменчивость, приводящая к образованию псевдовидов. Высокая изменчивость вируса препятствует формированию гуморального иммунитета. Нейтрализующие антитела сохраняются недолго и не могут предотвратить повторное заражение не только другим, но даже тем же самым штаммом вируса, то есть не возникает даже типоспецифический иммунитет. Одни генотипы вируса встречаются повсеместно, другие - только в определенных районах. Генотипы различаются по патогенности и чувствительности к противовирусным препаратам.
Первые методики ИФА для выявления вируса были основаны на определении антител к рекомбинантному антигену С100-3, аналогу белка NS4. Обычно эти антитела появляются через 1-3 мес после начала острого гепатита С , но иногда их не обнаруживают в течение года и более. В тестах второго поколения используют рекомбинантные белки С22-3 (аналог белка капсида), СЗЗс (аналог белка NS3) и С200, объединяющий СЗЗс и С100-3. Их чувствительность на 20% выше, чем у тестов первого поколения, и антитела выявляются на 30-90 дней раньше, во время острого гепатита. В тестах третьего поколения используют рекомбинантные и синтетические аналоги белка NS5, антитела к которому можно выявить еще раньше.
Поскольку при использовании вышеописанных тестов отмечались ложноположительные и ложноотрицательные реакции, для подтверждения диагноза применяют иммуноблоттинг (сыворотку инкубируют с нитроцеллюлозной мембраной, на которую нанесены рекомбинантные или синтетические вирусные антигены, разделенные с помощью электрофореза). Метод позволяет определить антитела к отдельным белкам вируса и выявить ложноположительные результаты ИФА. Последнее особенно важно при низкой априорной вероятности гепатита С (например, у доноров) или наличии антител, могущих дать ложноположительную реакцию (например, ревматоидного фактора ).
Однако с помощью серодиагностики невозможно выявить всех инфицированных вирусом гепатита С. Для этого лучше пользоваться определением вирусной РНК с помощью ПЦР ( рис. 295.7 ).
Можно использовать и метод разветвленной ДНК; он более прост, но менее чувствителен, чем ПЦР.
Вирусная РНК появляется в крови через несколько дней после заражения, задолго до появления антител, и сохраняется до выздоровления; при хроническом гепатите С она может появляться и исчезать.
Используя современные
высокочувствительные методы, удалось выявить вирусную РНК в лимфоцитах из
крови больных; так же как и в случае
гепатита В , клиническое значение проникновения вируса в лимфоциты не
установлено. Канцерогенез
вирусный: общие сведения
