Нокаут гена 18 кДа субъединицы ПБР
Разрушение гена (нокаут гена 18 кДа субъединицы ПБР ) в клетках линии R2C из опухоли семенника крысы вызывает снижение стероидогенеза до 5% по сравнению с контрольными клетками [ Papadopoulos ea 1997a ]. Селекционированные клетки не содержали белка м. м. 18 кДа, а митохондрии, выделенные из этих клеток, не способны образовывать прегненолон из добавляемого холестерина [ Papadopoulos ea 1997a ]. Трансфекция селекционированных клеток кДНК ПБР восстанавливала их стероидогенную активность. Значение ПБР изучалось с использованием методологии "нокаута" посредством антисенс-РНК [ Kelly-Hershkovitz ea 1998 ]. В результате трансфекции клеток МА-10 этой системой происходила down- регуляция 18 кДа компонента ПБР. В итоге снижалась емкость связывания лигандов, но не изменялась аффинность, уменьшалось накопление прогестерона. Клетки реагировали на 8-Вr-цАМФ, но спектр стероидов при этом отличался от синтезирующихся соединений в контрольных клетках [ Kelly-Hershkovitz ea 1998 ]. Таким образом, применение различных подходов "нокаута" дало различные результаты, но они не противоречивы. В том случае, когда субъединица 18 кДа совершенно не экспрессировалась в клетках [ Papadopoulos ea 1997a ], по всей видимости, стероидогенез подавлялся почти полностью, но уменьшение экспрессии субъединицы 18 кДа оставляло возможность некоторой продукции стероидов [ Kelly-Hershkovitz ea 1998 ].
