Порины дрожжей (белки 29 кДа)
29 кДа белок является преобладающим белком внешней мембраны митохондрий дрожжей [ Gasser ea 1983 , Riezman ea 1983 ]. Аналогичный белок из N. ciassa имеет молекулярную массу 31 кДа [ Cassady ea 1969 , Freitag ea 1982 , Manella ea 1989 , Neupert ea 1971 , Pfaller ea 1985 , Pfaller ea 1990 ]. При встраивании 29 и 31 кДа белков в фосфолипидную мембрану они индуцируют канал проводимости (4-4,5 nS в 1 М КС1) с эффективным диаметром 1,7 нм со слабо выраженной анионной селективностью. Переход из открытого в менее проводящее состояние канала зависит от величины мембранного потенциала [ Benz ea 1990 , Freitag ea 1982 ]. На этом основании каналобразующие белки внешней мембраны митохондрий дрожжей и N. crassa были отнесены к семейству поринов (по аналогии со сходными водорастворимыми белками наружной мембраны грамотрицательных бактерий), образующих водные поры -каналы. По своим эффективным размерам каналы, образуемые очищенными белками, напоминали поры, выявляемые во внешней мембране митохондрий методом электронной микроскопии [ Manella ea 1989 , Маnеllа ea 1990 , Manella ea 1989 ]. Дрожжевой порин и порин N. crassa, исследованные с помощью современных биохимических, биофизических, генетических методов, являются наиболее изученными белками из семейства поринов [ De ea 1987 ]. Получены двумерные кристаллы белков [ Manella ea 1989 , Маnеllа ea 1990 , Manella ea 1989 ]. Белки кодируется ядерным геномом, синтезируются на цитоплазматических рибосомах и транспортируются в митохондрии без отщепления сигнальной последовательности. Белок, синтезированный in vitro в гомологичных или гетерологичных системах, прочно связывается с внешней мембраной митохондрий и перестает быть доступным для действия трипсина [ Freitag ea 1982 , Gasser ea 1983 ]. Для правильного встраивания во внешнюю мембрану необходимы N- и С-концы молекулы [ Hamajima ea 1988 ]. Ген, кодирующий дрожжевой порин , был клонирован и секвенирован [ Mikara ea 1985 ], что позволило установить полную первичную структуру белка и предсказать многие детали вторичной структуры. Согласно этим предсказаниям, лишь первые 18 аминокислот могут образовывать амфифильную (то есть заряженную на одном конце и незаряженную на другом конце) а-спираль; остальная часть молекулы скручена, вероятно, в виде амфифильной бета- структуры, пересекающей мембрану 12-16 раз. Встраивание порина во внешнюю мембрану не сопровождается протеолизом, не зависит от трансмембранного потенциала [ Freitag ea 1982 , Freitag ea 1982 , Gasser ea 1983 ], хотя, возможно, и требует присутствия АТР [ Pfaller ea 1985 , Pfaller ea 1990 ].
Каналы пориновые: функционирование в митохондриях
Транспорт белков из цитозоля во внешнюю митохондриальную мембрану
Гипотеза о сопряжении мт-КК И ТАН
