Эффекторы Ras: регуляция активности клеточными белками
Из всех эффекторов ras ( p74raf , PI3K , GAP ), только для р74raf показана прямая активация ras'ом, и описан ее механизм. Но даже если принять гипотезу о том, что ras действительно активирует два других белка, это не даст адекватной картины. Все эти белки испытывают разнообразное влияние со стороны других компонентов клетки, также регулирующих их активность. Ser/Thr киназа raf взаимодействует с различными клеточными белками. Существенно, что raf подвергается множественному фосфорилированию как по Ser/Thr, так и по Tyr-сайтам после стимуляции факторами роста . По крайней мере два фермента принимают участме в активации raf: это PKC и PDGF-R . PDGF-R фосфорилирует raf по Tyr, что повышает киназную активность последнего примерно в 5 раз ( Morrison D.K. ea, 1989 ); это первый пример стимуляции ферментативной активности напрямую рецептором фактора роста . PKC, по-видимому, фосфорилирует raf по Ser. Отмечено, что совместная экспрессия PKC и raf в фибробластах NIH3T3 индуцировала образование колоний в мягком агаре, т.е. переводила клетки на следующую ступень трансформации ( Kolch W. ea, 1993 ). Существуют и PKC-независимые пути фосфорилирования raf.
р85 , регуляторная субъединица PI3K , фосфорилируется рецепторами факторов роста по Tyr, правда, при этом не наблюдалось повышение активности фермента. Вероятно, в интактных клетках активация PI3K достигается за счет ее переноса к мембране , где находятся ее субстраты.
GAP , подобно р74raf и PI3K, ассоцирует с рецепторами факторов роста и фосфорилируется ими по Tyr, однако, влияет ли это на какие-нибудь его функции, неясно.
Известно, что связывание GAPа с его предполагаемым эффектором, р190 , ослабляет GTPаз-стимулирующую активность ras.
Второе, довольно необычное, обстоятельство - то, что GAP может физически взаимодействовать с некоторыми липидами, включая фосфатидную кислоту , PI4P , арахидоновую кислоту (она образуется при гидролизе ДАГ специфической фосфолипазой). Это также инактивирует GAP ( Tsai M.H. ea, 1990 ).
