Варианты (штаммы) прионов: общие сведения
Интересной особенностью прионных белков является возможность принимать различные паталогические конформации, называемые вариантами, или штаммами приона. Для [Psi+] эти варианты характеризуются в первую очередь различной степенью проявления супрессорного фенотипа. Разница в фенотипе проявляется из-за различий в концентрации мономерного белка в клетке и, соответственно, разной способности к агрегации. Сильные варианты [Psi+] имеют мало свободного мономера, сильную супрессию и белые колонии, слабые варианты - слабую супрессию и розовые колонии ( Zhou et al., 1999 ; Kochneva-Pervukhova et al., 2001 ; Uptain et al., 2001 ). Сильные варианты доминируют над слабыми. Если скрестить две линий дрожжей [Psi+] c вариантами разной силы, то проявляться будет сильный фенотип. Варианты продемонстрированы для Sup35 , Rnq1 , Ure2 , а также для приона человека PrP .
Белок RNQ устроен несколько проще. Его Q/N богатый район (последние 154-405 а.к.) очень похож на таковой у Sup35 ( Sondheimer, Lindquist 2000 ). При замене N домена Sup35 на Q/N богатый район Rnq1 химерный белок способен вызывать супрессорный фенотип, аналогичный [Psi+] . Следовательно, Q/N богатый район Rnq1 обуславливает прионные свойства этого белка. Функция Rnq1 белка пока неизвестна. Для [Pin+] состояния не определено собственного фенотипического проявления. [Pin] фенотип тестируется по образованию [Psi+] de novo при оверэкспрессии Sup35 или в модельных системах с использованием химерных белков. При слиянии прионного домена Rnq1 с МС-доменом Sup35 за агрегацией можно следить по Ade-супрессии, а при слиянии с GFP - по образованию цитологически видимых светящихся агрегатов, которые стабильно наследуются в клетках дрожжей.
