Промоторы генов, контролируемых MAT

По кассетной модели переключений типа спаривания в промоторах alfa-специфичных генов , a-специфичных генов и гаплоид-специфичных генов должны находиться последовательности, с которыми связываются транскрипционные регуляторы - продукты локуса МФТ. Их выявили с помощью делеционного анализа промоторов по способности активировать химерные гены . Эти последовательности использовали для изучения функции белков МAТ in vitro.

Сопоставив данные о нескольких промоторах, вывели обобщенную нуклеотидную последовательность связывания белка alfa1 - сайт Q а также обобщенную регуляторную последовательность a-специфичных генов ( Miller et al, 1985 ).

Оказалось, что и в a-специфичных генах, и в alfa-специфичных генах имеется сайт P, с которым связывается белок PRTF , кодируемый геном MCM1 ( Keleher et al., 1989 ; Passmore et al., 1988 ; Jarvis et al., 1989 ). Сайт P в промоторах alfa-специфичных генов - это несовершенный палиндром, который служит сайтом активации только в клетках alfa.

Искусственно синтезированный совершенный палиндром является активатором и в a-, и в alfa-клетках. В a-специфичных генах сайт P близок к совершенному палиндрому, следовательно, является активатором и в a-, и в alfa-клетках. В связи с этим была предложена модель регуляции экспрессии a-специфичных генов и alfa- специфичных генов, по которой a-специфичные гены в клетках а экспрессируется конститутивно, так как для активации достаточно одного продукта гена MCM1. Для активации alfa- специфичных генов необхолимо взаимодействие РRTF и белка alfa1, образующегося только в клетках alfa. Белок alfa2 в клетках alfa блокирует транскрипционную активацию, индуцируемую PRTF ( Jarvis et al., 1989 ). Как уже было сказано, показано взаимодействие PRTF с белком alfa1. В белке PRTF выявлены домен, связывающийся с ДНК, и домен, связывающийся с alfa1, причем связывание с alfa1 изменяет конформацию PRTF ( Tan, Richmond, 1990 ).

Выявлена обобщенная регуляторная последовательность, необходимая для репрессии гаплоид-специфичных генов (и MAT, в том числе) в клетках a/alfa ( Dietzel, Kurrjan, 1987 ; Miller et al., 1985 ). В гаплоид-специфичных генах присутствует от одной (MATalfa), до десяти ( HO ) копий этой последовательности. Она отличается от таковой в a-специфичных генах: отсутствует P-сайт , ее центр не является консервативным, поэтому предполагают, что с ней связывается alfa2 в комплексе с каким-то другим белком, например белком a1.

Ссылки: