Трехсайтовые скрещивания
При скрещивании двойного мутанта с одиночным возможно два типа расположения мутаций. Серию штаммов с двойными мутациями, образующими небольшие перекрывающиеся контролируемые участки, скрещивают со штаммами, несущими одиночные картируемые точковые мутации, и учитывают митотическую рекомбинацию . У диплоидов прототрофные рекомбинанты будут появляться с низкой частотой, если точковая мутация попадает в контролируемый участок, и с довольно высокой частотой, если она не попадает. В этом случае регистрируют только превышение частоты прототрофов над контрольным уровнем, не измеряя его точно.
Метод трехсайтовых скрещиваний можно отнести к полуколичественным методам внутригенного картирования , поскольку в каждой комбинации приблизительно оценивают, сколь много рекомбинантов появляется в селективных условиях.
Подобным образом были картированы мутации в гене ADE2 . Точковую мутацию располагали в контролируемом участке, если на отпечатке гибрида появлялось менее 20 рекомбинантов, вне этого участка - если количество рекомбинантов превышало 40 ( Инге-Вечтомов и др., 1975 ; Кваша и др., 1976 ). Единой схемы выделения двойных мутантов не существует и это снижает ценность данного метода.
