Рецепторы тирозинкиназный активированный: образов. белкового комплекса
В ряде работ показано, что активированные тирозинкиназные рецепторы образуют комплекс с определенным набором цитоплазматических белков ( Kazlauskas A. and Cooper J.A., 1989 ; Kaplan D.R. ea, 1990 ; Morrison D.K. ea, 1989 ). Идентификация SH2-доменов и обнаружение их в большинстве белков, ассоциирующихся с активированными GF-R - PLC-гамма ( фосфолипаза С-гамма - фермент фосфатидилинозитольного пути ), GAP , Grb2 , p85 (регуляторная субъединица PI3K ) - пролили свет на природу взаимодействия с тирозинкиназными активированными рецепторами ( EGF-R , PDGF-R , HGF/SF-R )
Таблица 4. Белки цитоплазматические, образующие комплекс с рецепторами тирозинкиназными активированными (EGF-R, PDGF-R, HGF/SF-R)
GAP | PLC-гамма | Grb2 | p74raf* | p85 | |
Наличие SH2-доменов | 2 | 2 | 1 | - | 2 |
Фосфорилирование по Tyr рецепторами | + | + | - | + | + |
Изменение их ферментативной активности | - | повышение** | - | повышение в 4-6 раз | - |
* - Ser/Thr киназа - см. p74raf
** - не показано прямо. После стимуляции GF происходит повышение концентрации соответствующих метаболитов.
Для успешного образования комплекса необходимо фосфорилирование рецептора по Tyr остаткам ( Kazlauskas A. and Cooper J.A., 1989Kaplan D.R. ea, 1990 ; Anderson D. ea, 1990 ), а SH2-домены имеют сродство к фосфотирозину. Кроме того, было прямо продемонстрировано, что SH2-области GAP и PLC связывались in vitro с иммобилизованными EGF-R и PDGF-R ( Anderson D. ea, 1990 ).
Однако, остается неясным, во-первых, с какими конкретно тирозиновыми остатками связываются различные составляющие комплекса, во-вторых, конкурируют ли эти белки за места связывания. С одной стороны, Андерсон и сотрудники показали, что в клетках, экспрессирующих в 10 раз больше PLC-гамма, связывание рекомбинантных SH2- доменов GAP c активированными EGF-R и PDGF-R ослаблено. В то же время при исследовании мутантного PDGF-R (делеция вставочной области - см. Факторы роста: активация путей проведения сигнала ) было обнаружено, что этот рецептор не связывал р85 , р74raf и GAP , но автофосфорилирование и взаимодействие с PLC-гамма мутацией затронуты не были ( Kaplan D.R. ea, 1990 ; Morrison D.K. ea, 1989 ).
Для белка Grb2 , открытого позднее ( Lowenstein E.J. ea, 1992 ), выявлен предполагаемый сайт связывания с EGF-R (Tyr1068, Li N. ea, 1993 ), однако, конкурирует ли он с какими-либо белками за него, не выяснено.
