Частота потерь и нерасхождения хромосом в митозе
При изучении механизма митотической сегрегации исследуют частоту потерь и нерасхождения природных и искусственных хромосом . Разработан метод учета потерь и нерасхождения минихромосом на одно клеточное деление ( Hieter et al., 1985 ). Штаммы были маркированы нонсенс-мутацией ade1 или ade2 (накопление красного пигмента), и трансформированы плазмидой с центромером и нонсенс-супрессором SUP11 . Одна доза cупрессора приводит к розовой окраске, две дозы - к белой. Если при делении произошла потеря одной копии, то образуется секторная колония: половина красная, половина розовая (т.е. одна половина клеток в колонии содержала 1 дозу супрессора, а другая не содержала ни одной), если нерасхождение, то половина колонии (содержащая две дозы супрессора) будет белая, вторая половина (не содержащая ни одной дозы) красная. Оценивая частоту случаев можно оценить частоту потерь и нерасхождений на митоз. Вариант этого метода был предложен в работе Koshland et al., 1985 . Eще один способ - регистрация частоты бесплазмидных клеток в популяции - методически проще, но при этом невозможно различить потери и нерасхождение, а оценить их частоту на деление можно только приблизительно.
