AIF-фактор (фактор, индуцирующий апоптоз)

Апоптоз (программированная клеточная гибель) может реализовываться и без участия каспаз. Путь апоптоза, независимый от каспаз, запускается при деструкции митохондрии и высвобождении фактора, индуцирующего апоптоз (AIF). АФК и Са2+ открывают митохондриальную пору, что вызывает набухание митохондрий, повреждение их наружной мембраны и выход из межмембранного пространства в цитоплазму цитохрома с и AIF.

AIF - митохондриальный флавопротеин межмембранной локализации с молекулярной массой 57кДа, состоит из 613 аминокислотных остатков. Ген AIF картирован в локусе Xq25-26 [ Susin ea 1999 ].

При поступлении апоптотического сигнала происходит транслокация AIF из митохондрии в цитоплазму , а затем в ядро [ Daugas ea 2000 ].

Механизм включения апоптоза посредством AIF состоит в активации эндонуклеазы, расщепляющей ядерную ДНК [ Daugas ea 2000 , Susin ea 2000 , Susin ea 1999 ]. AIF, как показано, может и самостоятельно вызывать падение трансмембранного потенциала митохондрий , конденсацию хроматина и фрагментацию ДНК [Susin S.A., ea, 1999 ]. При действии AIF на изолированные ядра клеток линии HeLa наблюдается конденсация хроматина и фрагментация ДНК. Микроинъекция AIF в интактные фибробласты крыс приводит к снижению мембранного потенциала в митохондриях, быстрой (в течение 1 мин.) конденсации хроматина по периферии ядра и разрыву ДНК на крупные фрагменты длиной 50 т.п.н. и больше. Добавление AIF к изолированным митохондриям печени крыс вызывает высвобождение в раствор цитохрома с и каспазы 9 [ Susin ea 1999 ]. Ни один из этих эффектов AIF не предотвращается ингибитором каспаз N-бензилокси-карбонил-Val-Ala-Asp-фторметилкетоном ( Z-VAD-fmk ), который предотвращает апоптоз, индуцированный в эксперименте цитохромом с. Эти данные доказывают тот факт, что AIF является митохондриальным эффектором апоптоза у животных, действующим независимо от каспаз [ Susin ea 1999 ].

Важная роль AIF как медиатора апоптоза была также показана в исследовании на эмбриональных стволовых клетках мышей - клетки с дефицитом AIF устойчивы к апоптозу [ Cregan ea 2002 ].

Флавопротеин AIF, будучи добавленным к изолированным ядрам из клеток HeLa, вызывает конденсацию хроматина и фрагментацию ДНК, а при добавлении к изолированным митохондриям печени крыс - высвобождение цитохрома с и каспазы 9 [ Susin, ea 1999 ].

Микроинъекция AIF в интактные фибробласты крыс приводит к конденсации хроматина по переферии ядра, разрыву ДНК на крупные фрагменты длиной 50 т.п.н. и больше, диссипации дельта пси в митохондриях и переходу фосфатидилсерина из внутреннего слоя цитоплазматической мембраны в наружный. Ни один из этих эффектов AIF не предотвращается пептидным ингибитором каспаз Z-VAD.fmk , который предотвращает апоптоз, индуцированный микроинъецированным цитохромом с . Эти данные показывают, что AIF является митохондриальным эффектором апоптоза у животных, действующим независимо от каспаз [ Susin, ea 1999 ].

Ссылки:

Все ссылки